SEP SNEST DGEST
UNIDAD VI:
TRANSCRIPCIÓN GENÉTICA
QUE PRESENTA:
Arisbeth Salgado Mendoza
09930054
Lic. BIOLOGIA VI "A"
Ciudad Altamirano, Gro. México. MAYO del 2012
INTRODUCCIÓN:
La transcripción del ADN es
el primer proceso de la expresión génica, mediante el cuál se transfiere la información contenida en
la secuencia del ADN hacia la secuencia de proteína utilizando diversos ARN como intermediarios. Durante la
transcripción genética, las secuencias de ADN son copiadas a ARN mediante una enzima llamada ARN polimerasa que sintetiza un ARN mensajero que mantiene la información de la
secuencia del ADN. De esta manera, la transcripción del ADN también podría
llamarse síntesis del ARN mensajero. También por el cual se
sintetiza un ARN usando como molde al ADN. Muchos tipos de ARN pueden ser
sintetizados asì por la enzima ARN polimerasa, el ARN ribosomal el de
transferencia, los pequeños ARN nucleares o citoplasmáticos y por supuesto los
ARN mensajeros, que serán luego traducidos a una cadena polipeptídica. El
proceso de la transcripción de los mensajeros es diferente en procariotas y
eucariotas. Esto es debido a las diferencias propias entre los genes de las
bacterias y los de las celulas de animales superiores.Los genes eucariotas son
complejos y discontínuos es decir que poseen regiones codificantes (que
formarán parte de la proteína) y otros que son no codificantes y se remueven
rapidamente antes que el ARN salga al citoplasma a ser traducido. Las regiones
codificantes se llaman EXONES y las no codificantes se llaman INTRONES.La transcripción comienza en
el punto 0 (cero) muy cerca del promotor y termina en las bacterias en
una secuencia llamada terminadora. La polimerasa al copiar esa región de ADN,
se enlentece y se desprende del molde. En algunos casos hay una proteína que
ayuda en ese proeceso denominada Rho.Un esquema del ARN
trasncripto de esa región termiandora se pliega en el espacio fromando una
horquilla ya que el ARN es de cadema simple.
OBJETIVOS:
- Conocerá los eventos de síntesis del ARN como molécula precursora de la síntesis proteica y su importancia en el funcionamiento de los seres vivos.
METODOLOGÍA:
En esta unidad veremos como se lleva acabo la transcripción genética en general como procariontes y eucariotes las cuales llevan unas series de etapas muy definidas y sobre todo las modificaciones postranscripciones del RNA mensajero en general en eucariotes. Como vallamos aprendiendo vallamos avanzando poco a poco con el contenido de estos subtemas..
6.1 ORGANISMOS PROCARIONTES:
En
los operones inducibles, el inductor contrarresta el efecto del represor
uniéndose a él y manteniéndolo en una forma inactiva. Así, cuando el inductor
está presente, el represor ya no puede unirse al operador y pueden proseguir la
transcripción y la traducción.
En los procariotas, la transcripción a menudo
da como resultado una molécula de mRNA con secuencias que codifican varias
cadenas polipeptídicas diferentes (mRNA policistrónico). Las secuencias están
separadas por codones de terminación y de iniciación. En este diagrama, los
codones de terminación y de iniciación son contiguos pero, en algunos casos,
pueden estar separados por hasta 100 a 200 nucleótidos. El extremo 5' de la
molécula de mRNA tiene una secuencia conductora corta y el extremo 3' tiene una
secuencia cola; ninguna de estas secuencias codifica proteínas. La traducción
generalmente comienza en el extremo conductor de la molécula de mRNA, mientras
que el resto de la molécula aún está siendo transcripta.
La molécula de mRNA recién sintetizada tiene una corta secuencia
"guía" en su extremo 5', la secuencia de Shine-Dalgarno, que es la
que se une al ribosoma. La región codificadora de la molécula es una secuencia
lineal de nucleótidos que dicta con precisión la secuencia lineal de
aminoácidos en cadenas polipeptídicas determinadas. Puede haber varios codones
de terminación e iniciación dentro de la molécula de mRNA, marcando el fin de
un gen estructural y el comienzo del siguiente, respectivamente. Cada uno de
los codones de iniciación tiene que estar precedido por un sitio de unión al
ribosoma. Una secuencia adicional de nucleótidos en el extremo 3' se conoce
como "cola". Los ribosomas se acoplan a la molécula de mRNA aun antes
de que la transcripción se haya completado.
En los procariotas, la transcripción a menudo
da como resultado una molécula de mRNA con secuencias que codifican varias
cadenas polipeptídicas diferentes (mRNA policistrónico). Las secuencias están
separadas por codones de terminación y de iniciación. En este diagrama, los
codones de terminación y de iniciación son contiguos pero, en algunos casos,
pueden estar separados por hasta 100 a 200 nucleótidos. El extremo 5' de la
molécula de mRNA tiene una secuencia conductora corta y el extremo 3' tiene una
secuencia cola; ninguna de estas secuencias codifica proteínas. La traducción
generalmente comienza en el extremo conductor de la molécula de mRNA, mientras
que el resto de la molécula aún está siendo transcripta.
En los operones represibles, en ausencia del correpresor,
el represor se encuentra inactivo. En este estado, la transcripción y la
traducción ocurren permanentemente. En presencia de un correpresor, se forma un
complejo represor-correpresor y el represor se activa. Así puede unirse al
operador bloqueando la transcripción.
6.1.1 ETAPAS DE SÍNTESIS DEL ARN
Con
la finalidad de ordenar el estudio de la transcripción, dividiremos la misma en
Cuatro etapas fundamentales:
1°
etapa- UNIÓN de la ARN polimerasa al
ADN
2°
etapa- INICIACIÓN de la síntesis
3°
etapa- ELONGACIÓN de la cadena de ARN
mensajero
4°
etapa- TERMINACIÓN de la síntesis y
liberación de la cadena de ARNm.
El Promotor Procariota: la señal de inicio
Se
mencionó anteriormente que la ARN polimerasa se
unía a un sitio específico del
ADN denominado Promotor. La enzima es capaz de reconocer este sitio del
ADN y, convenientemente, abrir
localmente las cadenas de ADN para poder leer la cadena molde. Es de esperarse entonces que, el sitio
de contacto con la Holoenzima tuviese regiones
comunes a todos los Promotores. Se ha comprobado que estos sitios mencionados
contienen secuencias de bases comunes, a
las que se las ha denominado “Secuencias de Consenso”. Por mera convención
entre los científicos, se considera que el sentido de la transcripción de un gen determinado es hacia la derecha. Al
punto en el cual se inicia este proceso se
lo denomina “punto 0”. Con
números negativos se señalan las bases ubicadas a la izquierda del punto 0. Con
el mismo criterio, se señalan con números positivos a las bases ubicadas a la derecha del punto 0.
La
secuencia de consenso más importante y mejor estudiada, comprende seis bases y
su centro está ubicado a diez bases a la
izquierda del punto de inicio (-10). La secuencia de consenso es TATAAT y se la denomina “TATA box o Caja Pribnox”. Esta caja es responsable de orientar a la ARN polimerasa
en la dirección de síntesis de ARN y es la
región en la cual la doble hélice se abre para formar el Complejo
Promotor Abierto. El hecho de que la
TATA box contenga las bases A-T no es mera casualidad, ya que estas La unión de la Holoenzima con el promotor, determina
el Complejo Promotor se unen con sus complementarias por medio de dos
enlaces del tipo Puente de Hidrógeno, lo
cual implica un menor gasto de energía para la apertura del ADN.
INICIACIÓN de la síntesis del ARN mensajero
La
iniciación se produce mediante la unión de la ARN polimerasa (Holoenzima)
al ADN de doble cadena. Para que la
cadena molde esté disponible para el apareamiento de bases con los
ribonucleótidos, las dos cadenas de ADN deben separarse. El desenrollamiento es local y se produce cuando
la Holoenzima contacta con la TATA Box.
Una
vez que el complejo promotor se encuentra abierto, la ARN pol. Comienza la síntesis.
La fase de iniciación no se completa hasta que se hallan polimerizado los primeros
seis ribonucleótidos.
ELONGACIÓN de la cadena:
Después
que se han colocado los primeros seis ribonucleótidos, la ARN polimerasa sufre
un cambio en su conformación, perdiendo la sub unidad σσσ. Se continúa la
síntesis en el estado de Core anteriormente descrito.
El
Core se mueve a lo largo del ADN colocando los ribonucleótidos complementarios
a la cadena de ADN molde, abriendo la hélice a medida que se desplaza. Los ribonucleótidos
se unen al extremo 3’ de la cadena de ARN en crecimiento, formándose un Híbrido ARN-ADN en la región desenrollada, el
cual se mantiene estabilizado mediante enlaces puente de Hidrógeno. El híbrido
tiene una longitud aproximada de 12 pb y el nuevo ARN es liberado de estas
uniones cuando el ADN recupera su estado de doble hélice por desplazamiento del
Core.
TERNINACIÓN y LIBERACIÓN del ARN sintetizado
La
terminación ocurre en una secuencia determinada del ADN, denominada Secuencia Ternimadora.
En este punto, la enzima deja de añadir los ribonucleótidos a la cadena de ARN
en crecimiento, liberando el producto terminado y disociándose del ADN. La terminación requiere que todos los enlaces
Puente de Hidrógeno, que mantenían al Híbrido ARN – ADN, se rompan volviéndose
a reconstituir el ADN dúplex.
6.2 ORGANISMOS EUCARIOTICOS:
El proceso se realiza en
el núcleo, y es similar al de las procariotas, pero de mayor
complejidad. Diferentes ARNp transcriben distintos tipos de genes. La ARNpII
transcribe los pre-ARNm, mientras que la ARNpI y ARNpIII transcriben los
ARN-ribosomales y ARNt, respectivamente. Los ARNs transcritos son modificados
posteriormente. El pre-ARNm,por ejemplo, sufre un proceso de maduración que
tras cortes y empalmes sucesivos elimina ciertos segmentos del ADN llamados los intrones para producir el ARNm
final. Durante este proceso de maduración se puede dar lugar a diferentes
moléculas de ARN, en función de diversos reguladores. Así pues, un mismo gen o
secuencia de ADN, puede dar lugar a diferentes moléculas de ARNm y por tanto,
producir diferentes proteínas. Otro factor de regulación propio de las células
eucariotas son los conocidos potenciadores (en inglés: "enhancers"),
que incrementan mucho (100 veces) la actividad de transcripción de un gen, y no
depende de la ubicación de éstos en el gen, ni la dirección de la lectura.
Ya se ha mencionado
que, en las células del tipo Eucariota, encontramos tres tipos de ARN polimerasa las cuales se denominan: ARN
polimerasa I, ARN polimerasa II y ARN
polimerasa III. Sus composiciones en sub unidades son complejas y aun no se conoce
en exactitud la función de cada una de estas sub unidades. Lo que sí se conoce con
exactitud, es la localización y el producto de cada una de ellas.
Los promotores de la
ARN Polimerasa II muestran una mayor variación en secuencia y la enzima es
incapaz de iniciar la transcripción sola, sino que requiere de una serie de factores
de transcripción, los cuales son los encargados del reconocimiento de un promotor
particular. Recordemos que, en las células Procariotas, el factor sigma es el que
le confiere a la ARN Polimerasa la capacidad de seleccionar a cada uno de los promotores.
En Eucariotas, al
igual que en los Procariotas, las homologías en las regiones próximas al punto
de inicio están restringidas a
secuencias relativamente cortas.
La mayoría de los
promotores tienen una secuencia denominada
TATA box o Caja Hogness, centrada a –25 Pb del punto de inicio.
Esta TATA box es idéntica a la mencionada
en la Transcripción de las células Procariotas, variando solamente en su localización.
6.2.1 ETAPAS DE SÍNTESIS DEL ARN
Clásicamente
se divide el proceso de la transcripción en 3 etapas principales (iniciación,
elongación y terminación), pero realmente se pueden diferenciar 5 etapas:
Preiniciación
Al
contrario de la replicación de ADN,
durante el inicio de la transcripción no se requiere la presencia de un cebador
para sintetizar la nueva cadena, de ARN en este caso. Antes del inicio de la
transcripción se necesitan toda una serie de factores de transcripción que
ejercen los factores de iniciación. Estos se unen a secuencias específicas de
ADN para reconocer el sitio donde la transcripción ha de comenzar y se
sintetice el ARN cebador. Esta secuencia de ADN en la que se ensamblan los
complejos de transcripción se llama promotor. Los promotores se localizan en
los extremos 5'-terminales de los genes, antes del comienzo del gen, y a ellos se unen los factores de transcripción mediante fuerzas de Van der Waals yenlaces de hidrógeno.
Los promotores tienen secuencias reguladoras definidas, muy conservadas en cada
especie, donde las más conocidas son la caja TATA (situada sobre la región -10), con la
secuencia consenso TATA(A/T)A(A/T); y la caja TTGACA (situada en el punto -35).
La formación del complejo de transcripción se realiza sobre el promotor TATA,
allí se forma el núcleo del complejo de iniciación. Sobre la caja TATA se fija
una proteína de unión (TBP) junto con el factor de transcripción TFII D (TF proviene del inglés: transcription factor). Después,
a ellos se unen otros factores de transcripción específicos: TFII A,
que estabiliza el complejo TFII D-ADN; los factores TFII B y TFII E se unen al ADN y el TFII F (una helicasadependiente de ATP) y al final la
ARN polimerasa. Todo ello forma un complejo que se llama complejo de preiniciación cerrado.
Cuando la estructura se abre por mediación del factor de transcripción TFII
H, da comienzo la iniciación..
INICIACIÓN:
Primero, una Helicasa separa las hebras de ADN en estas
denominadas cajas TATA, ya que entre adenina y timina se establecen dos enlaces
de hidrógeno, mientras que entre citosina y guanina se forman tres.
Posteriormente se unen los factores y las proteinas de transcripción (TBP,
TF2D, TF2B) permitiendo, de esta manera, el acceso de la ARN polimerasa al
molde de ADN de cadena simple, siendo esta la ultima en posicionarse. Aunque la
búsqueda del promotor por la ARN polimerasa es muy rápida, la formación de la burbuja de transcripción o apertura del ADN y la síntesis del
cebador es muy lenta. La burbuja de transcripción es una apertura de ADN
desnaturalizado de 18 pares de bases, donde empieza a sintetizarse el ARN
cebador a partir del nucleótido número 10 del ADN molde de la burbuja de
transcripción. La burbuja de transcripción se llama complejo abierto. La ARN
polimerasa es una enzima formada por 5 subunidades: 2 subunidades α, 1
subunidad β, 1 subunidad β' y 1 subunidad ω que tiene como función la unión de ribonucleótidos trifosfato. Cuando se forma el complejo
abierto, la ARN polimerasa comienza a unir ribonucleótidos mediante enlaces fosfodiéster, y una vez que se forma el
primer enlace fosfodiéster, acaba la etapa de iniciación.y comienza asi la
siguiente etapa.
DESINTEGRACIÓN DEL MOTOR
Una vez sintetizado el primer enlace fosfodiéster, se
debe deshacer el complejo del promotor para que quede limpio para volver a
funcionar de nuevo. Durante esta fase hay una tendencia a desprenderse el
transcrito inicial de ARN y producir transcritos truncados, dando lugar a una
iniciación abortada, común tanto en procariontes como eucariontes. Una vez que
la cadena transcrita alcanza una longitud de unos 23 nucleótidos, el complejo
ya no se desliza y da lugar a la siguiente fase, la elongación.
La disgregación del promotor coincide con una
fosforilación de la serina 5 del dominio carboxilo terminal de la ARN
polimerasa, que es fosforilado por el TFII H (que es una proteínaquinasa dependiente
de ATP)
ELONGACIÓN
La ARN polimerasa cataliza la elongación de cadena del
ARN. Una cadena de ARN se une por apareamiento de bases a la cadena de ADN, y
para que se formen correctamente los enlaces de hidrógeno que determina el
siguiente nucleótido del molde de ADN, el centro activo de la ARN polimerasa
reconoce a los ribonucleótidos trifosfato entrantes. Cuando el nucleótido
entrante forma los enlaces de hidrógeno idóneos, entonces la ARN polimerasa
cataliza la formación del enlace fosfodiéster que corresponde. A esto se le llama
elongación, la segunda etapa de la transcripción del ARN.
TERMINACION
Al finalizar la síntesis de ARNm, esta molécula ya se ha
separado completamente del ADN (que recupera su forma original) y también de la
ARN polimerasa, terminando la transcripción. La terminación es otra etapa
distinta de la transcripción, porque justo cuando el complejo de transcripción
se ha ensamblado activamente debe desensamblarse una vez que la elongación se
ha completado. La terminación está señalizada por la información contenida en
sitios de la secuencia del ADN que se está transcribiendo, por lo que la ARN
polimerasa se detiene al transcribir algunas secuencias especiales del ADN.
Estas secuencias son ricas en guanina y citosina, situadas en el extremo de los genes, seguidas de
secuencias ricas en timina, formando secuencias palindrómicas, que cuando se
transcriben el ARN recién sintetizado adopta una estructura en horquilla que desestabiliza el complejo ARN-ADN,
obligando a separarse de la ARN polimerasa, renaturalizándose la burbuja de
transcripción. Algunas secuencias de ADN carecen de la secuencia de
terminación, sino que poseen otra secuencia a la que se unen una serie de
proteínas reguladoras específicas de la terminación de la transcripción como rho .
6.2.2 MODIFICACIONES POSTRANSCRIPCIONALES DEL RNA MENSAJERO
Los productos
inmediatos de la transcripción se denominan transcritos primarios y no son
necesariamente funcionales; muchos de ellos son específicamente alterados en
varias formas como son:
- Remover segmentos exo o endonucleotidicos.
- Adición de secuencias nucleotidicas en
cualquiera de los dos extremos (5´ ó 3´).
- Modificación de nucleótidos específicos.
En los procariontes, la mayoría de los transcritos primarios son
funcionales inmediatamente después, e incluso durante su síntesis. Es decir
estos mARN participan en la traducción, sin modificación alguna. De
hecho, en estos organismos, los ribosomas usualmente comienzan la traducción en
la cadena naciente del mensajero.
En los eucariontes por el contario, el mARN es
producido en el núcleo y su traducción ocurre en el citoplasma. En el nucleoplasma,
durante el camino al citoplasma, losmARN sufren alteraciones en su
estructura. A estos cambios se les denomina modificaciones postranscripcionales.
Los mARNs eucariontes
maduros, poseen una capucha que es agregada enzimáticamente y que
consiste de un residuo de 7-metilguanosina unido
en el extremo inicial (5´) por un enlace trifosfato (5´-5´):
La estructura de la capucha de los mARNs eucariontes se puede encontrar en tres
formas:
0: no tiene
modificaciones (forma predominante en organismos eucariontes unicelulares).
1:
el nucleótido líder está 02´metilado (forma predominante en organismos
multicelulares).
2:
los dos primeros nucleótidos están 02´metilados.
La capucha es
unida por una guanililtransferasa específica, después de » 20 nucleósidos,
define el sitio de inicio de la traducción. Si el nucleósido líder es adenosina (generalmente es
una purina), puede estar también metilada en
posición N6.
Los mARNs eucariontes a
diferencia de los procariontes, son siempre monocistrónicos, esto quiere
decir que contienen información únicamente para un gen, a diferencia de los operones procariontes. La señal de
terminación de la transcripción el los eucariontes, no se ha determinado con
precisión, esto se debe a que el proceso es impreciso i.e. los transcritos
primarios de los genes estructurales tienen secuencias 3´
heterogéneas. A pesar de lo anterior, los ARNs maduros
presentan secuencias 3´ definidas, casi todos ellos
terminan en colas de poli A de 20 a 50 nucleótidos, que no son necesarios para
la transcripción in vitro. Las colas de poliA, se unen a
la proteína de unión al poli(A) (PABP), lo que genera una ribonucleoproteína.
PABP protege al mARN; la presencia de esta proteína reduce la velocidad de
degradación del mARN.
La mutación de la cola poliA de un transcrito presenta
una vida media (t1/2) menor a 30 min en el
citoplasma, por el contrario, el mismo transcrito con su cola de poliA tiene
una t1/2 que varía de horas a días. Esta cola de poliA, es
agregada al transcrito primario en dos reacciones.
1.- el transcrito es cortado en una posición entre 15 a 25 nucleótidos
pasando una secuencia conservada AAUAAA, que al mutarse, inhibe el corte y la poliadenilación.
2.- la cola de poliA se genera a partir de ATP, gracias a la
catálisis de la poli(A)polimerasa
Durante o poco tiempo después de la síntesis de los pre-MARNs de
vertebrados, » 0.1% de los residuos de A, están metilados en
posición N6. Estos m6As, tienden a ocurrir en secuencia RRm6ACX,
en donde X es raramente una G. La función de este proceso es desconocida, pero
una gran cantidad de estos residuos forman parte del mARN maduro.
TAREA:
El splicing de ARN o empalme de ARN (del
inglés RNA splicing) es un proceso
post-transcripcional de maduración del ARN del cual eliminan ciertos fragmentos
secuenciales. Este proceso es muy común en eucariotas, pudiéndose dar en
cualquier tipo de ARN aunque es más común en el ARNm. También se ha descrito en el ARNr y ARNt de procariotas y bacteriófagos. Normalmente consiste en eliminar los intrones del transcrito primario y posteriormente unir los exones; aunque existen otros tipos de ajuste donde se
eliminan exones y/o retienen intrones.
Rutas de splicing
En la naturaleza existen diversos métodos de splicing
del ARN. El mecanismo de
splicing depende de la estructura del fragmento de ARN que pasará por este proceso.
El Spliceosoma es un complejo formado
por cinco ribonucleoproteínas nucleares pequeñas o snRNP (complejo
formado por unas diez proteínas más una pequeña molécula de ARN). El ARN de los snRNP es el
encargado de reconocer el intrón. Se han identificado dos tipos de spliceosomas, el mayor
y el menor, cada uno de los cuales
contiene diferentes tipos de snRNP.
Spliceosoma mayor
Esta formado por los snRNP U1,
U2, U4, U5 y U6. Reconoce la secuencia consenso GU
(Guanina-Uracilo) del extremo 5’ del intrón así
como la secuencia consenso AG
del extremo 3’. El 99% de los intrones lo
hacen a través de este mecanismo.
§
Complejo E: U1 se une a la secuencia consenso GU
del extremo 5’ del sitio de corte del intrón, junto con las proteínas accesorias ASF/SF2, U2AF,
SF1/BBP.
§
Complejo A: U2 se une al sitio de
ramificación e hidroliza ATP. El sitio de
ramificación se sitúa a una distancia de 20-40 nucleótidos del extremo 3’ del intrón y en él
se localiza la secuencia consenso CURAY.
§
Complejo B1: U5, U4 y U6 trimerizan, y U5 se
une al exón 5’ y U6 a
U2.
§
Complejo B2 – U1 es liberado, U5 pasa del exón al intrón y U6 se
une al extremo 5’ del sitio de corte.
§
Complejo C1: U4 es liberado, U5 se une al
sito de empalme del extremo 3’ del exón, U6 y U2 catalizan la reacción de transesterificación y el extremo 5’ del intrón es
cortado; como resultado se forma una estructura en lazo característica
denominada lariat.
§
Complejo C2: el extremo 3’ del intrón es
cortado lo que provoca la liberación del lazo de ARN. A continuación los exones son
ligados, lo que conlleva gasto de ATP. Por último, el
complejo se disocia.
Spliceosoma menor
Es similar al Spliceosoma mayor aunque los intrones eliminados
mediante este mecanismo son escasos, y además presentan diferencias en los
sitios de corte y empalme. También se diferencian en las secuencias consenso
reconocidas, que en este caso son AU y AC para los extremos 3’ y 5’,
respectivamente. Además, salvo la partícula snRNP U5,
el resto son análogos funcionales denominadas U11 (análogo funcional de la U1),
U12 (U2), U4atac (U4) y U6atac(U6).
Splicing en trans
También se puede denominar transempalme o empalme en
trans. Consiste en el empalme de exones de dos transcritos primarios distintos,
con la consiguiente formación de un ARN híbrido.
Autosplicing
Corte y empalme en el que el propio intrón actúa
como catalizador en su eliminación, por lo que no se requiere de proteínas.
Cuando un fragmento de ARN tiene actividad catalítica se le denomina ribozima. Para que el mecanismo de autosplicing sea
preciso se requiere de la hidrólisis de ATP. Existen dos tipos
de intrones que actúan como ribozimas, los intrones del grupo I y los del grupo II. La similitud en el mecanismo de corte y empalme
de estos intrones y el spliceosoma sugiere que probablemente evolucionaron juntos aunque
también se ha propuesto que el autosplicing surgió durante el mundo de ARN.
Intrones del grupo I
§
El grupo OH 3’ de un nucleósido libre de
guanina o del propio intrón o un
cofactor (GMP, GDP o GTP) ataca al fosfato del sitio de corte 5’. Lo que da lugar
al corte del intrón por su
extremo 5’ y a la formación del lariat (estructura en lazo).
§
El grupo OH 3’ del exón lleva a
cabo un ataque nucleofílico contra el extremo 3’ del intrón, lo que origina su corte y la liberación de la
estructura en lazo.
§
Los exones son
unidos.
Intrones del grupo II
§
El grupo OH 2’ de una adenosina específica
del intrón ataca el
sitio de corte 5’, originando la estructura en lazo (lariat).
§
El grupo OH 3’ del exón lleva a
cabo un ataque nucleofílico contra el extremo 3’ del intrón, lo que origina su corte y la liberación de la
estructura en lazo.
§
Los exones son
unidos.
Splicing de ARNt
Es un
mecanismo de corte y empalme poco usual que se observa en ARNt. El mecanismo involucra diferentes rutas bioquímicas como
la splceosomal y el autosplicing.
ERRORES DE SPLICING
Las mutaciones pueden afectar a los sitios de splicing,
lo que puede influir sobre la síntesis proteica de distintas formas:
§
Pérdida del sitio de splicing: puede originar
la aparición prematura de un codón de stop, la pérdida de un exón o la
inclusión de un intrón.
§
Reducir la especificidad: puede variar la
localización del sitio de splicing, lo que origina la inserción o deleción de aminoácidos o la pérdida de la pauta de lectura.
§
Transposición del sitio de splicing: origina
la inserción o deleción de ARN, lo que origina cadenas de ARN más cortas o
largas.
Splicing
alternativo
El splicing alternativo permite obtener a partir
de un transcrito primario de ARN distintas
moléculas de ARN maduras.
Este proceso ocurre principalmente en eucariotas aunque también puede
observarse en virus. Para más información consultar el artículo principal: Splicing alternativo.
CONCLUSIONES:
Aprendimos como ocurre la transcripción genética en eucariotes y procariontes y sus pasos detenidamente, sobre todo las modificaciones POSTRANSCRIPCIONALES del RNA mensajero el profesor nos define poco a poco cada tema establecido.
BIBLIOGRAFIA:
- http://genmolecular.wordpress.com/replicacion-y-transcripcion-del-adn/
- http://www.korion.com.ar/archivos/transytrad.pdf
- laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/.../transcripcion%20eucarionte.ht...
- http://es.wikipedia.org/wiki/Splicing_de_ARN
No hay comentarios:
Publicar un comentario